определение группы крови и резус фактора стандартными сыворотками

Содержание

Группы крови. Определение группы крови и резус-фактора

определение группы крови и резус фактора стандартными сыворотками

Многочисленными исследованиями было показано, что в крови могут находиться различные белки (агглютиногены и агглютинины), комбинацией (наличием или отсутствием) которых и образуются четыре группы крови.

Каждой группе дано условное обозначение: 0 (I), А (II), В (III), AB(IV).
Установлено, что переливать можно только одногруппную кровь.

В исключительных случаях, когда нет одногрупповой крови, а переливание жизненно необходимо, допустимо переливание иногруппной крови.

В этих условиях кровь 0 (I) группы можно перелить боль­ным с любой группой крови, а больным, имеющим кровь AB(IV) группы, можно перелить донорскую кровь любой группы.

Поэто­му, прежде чем начинать переливание крови, необходимо точно установить группу крови больного и группу пере­ливаемой крови.

 

Определение группы крови.

Для определения группы крови пользуются стандарт­ными сыворотками групп 0 (I), А (II), В (III), которые спе­циально готовят в лабораториях станций переливания крови.
На белой тарелке на расстоянии3—4 см слева на­право ставят цифры I, II, III, обозначающие стандартные сыворотки.

Каплю стандартной сыворотки 0(I) группы наносят пипеткой в сектор тарелки, обозначенный циф­рой I; потом второй пипеткой наносят каплю сыворотки А (II) группы под цифрой II; так же берут сыворотку В(III) группы и третьей пипеткой-наносят под цифрой III.

Затем обследуемому укалывают палец и стеклянной палочкой переносят вытекающую кровь в каплю сыворот­ки, находящейся на тарелке, и смешивают до равномер­ного окрашивания. В каждую сыворотку крови переносят новой палочкой.

Через 5 мин с момента окрашивания (по часам!) по изменению в смеси определяют группу крови.

В той сыворотке, где произойдет агглютинация (склеивание эритроцитов), появляются хорошо видимые красные зернышки и глыбки; в сыворотке, где агглюти­нации не произойдет, капля крови останется гомогенной, равномерно окрашенной в розовый цвет.

В зависимости от группы крови обследуемого агглютинация произойдет в определенных пробах. Если обследуемый имеет 0 (I) группу крови, то склеивания эритроцитов ни с одной сы­вороткой не произойдет.

Если обследуемый имеет А (II) группу крови, то агглютинации не будет только с сыво­роткой группы А (II), а если обследуемый имеет В (III) группу, то агглютинации не будет с сывороткой В (III).

Агглютинация наблюдается со всеми сыворотками, если исследуемая кровь будет AB(IV) группы.
 

Иногда даже при переливании одногруппной крови наблюдаются тяжелые реакции. Проведенные исследования позволили установить, что приблизительно у 15% людей в крови отсутствует особый белок, так назы­ваемый резус-фактор.

Если этим лицам провести повтор­ное переливание крови, содержащей этот фактор, то воз­никнет тяжелое осложнение, называемое резус-конфлик­том, и разовьется шок. Поэтому в настоящее время всем больным обязательно проводят определение резус-фак­тора, так как реципиенту с отрицательным резус-фактором можно переливать только резус-отрицательную кровь.

Ускоренный способ определения ре­зус-принадлежности. На стеклянную чашку Петри наносят 5 капель антирезус-сыворотки той же груп­пы, что и у реципиента. В сыворотку добавляют каплю крови обследуемого и тщательно перемешивают. Чашку Петри помещают на водяную баню при температуре 42— 45°С.

Результаты реакции оценивают через 10 мин. Если наступила агглютинация крови, то у обследуемого кровь резус-положительная (Rh+); если агглютинации нет, то исследуемая кровь резус-отрицательная (Rh—).

Разработан ряд других способов определения резус-фактора, в частности с помощью универсального антирезусного реагента D.

Обязательно определение группы крови и резус-принадлежности всем больным, находящимся в стационаре. Результаты исследования должны быть зане­сены в паспорт больного.

Источник: https://www.medglav.com/perelivanie-krovi/gruppy-krovi.html

Анализ на определение резус фактора и группы крови

определение группы крови и резус фактора стандартными сыворотками

Группа крови — это определенный набор антигенов и антител

Группа крови отражает наличие либо отсутствие определённого набора антигенов и антител. Располагаются антигены на поверхности форменных элементов крови — эритроцитах, антитела присутствуют в плазме крови.

Открытие характерных особенностей крови принадлежит Карлу Ландштейнеру. Австрийский врач в течение долгих лет пытался определить причину тяжёлых осложнений у некоторых пациентов после переливания крови.

Наконец ему удалось понять суть путём эксперимента: на примере 6 образцов крови учёный выявил физиологическую реакцию эритроцитов с различными сыворотками крови. Оказалось, что форменные элементы слипаются с антителами из сывороток других людей, происходит агглютинация.

Слипание образуется благодаря не самим эритроцитам, а антигенам, расположенным на них.

Благодаря Ландштейнеру медицина заговорила о группах крови

Антиген получил название агглютиноген, антитела к антигену — агглютинины. По принципу связывания агглютиногенов с определёнными агглютининами Ландштейнер выделил 3 группы крови.

Одна из них отличалась тем, что слипания эритроцитов при добавлении сыворотки в ней не происходило, то есть антигены в ней отсутствовали. За это она получила обозначение 0 (ноль), а две другие по наличию в них антигенов А и В. Таким образом в 1900 году была основана система групп крови АВ0.

Несколько лет спустя ученики Ландштейнера определили 4-ю группу крови, которая, в отличие от предыдущих групп, обладала сразу двумя антигенами — А и В.

На сегодняшний день существует 36 систем групп крови, но в медицинской практике наибольшее распространение и значение имеет по-прежнему система АВ0, а также резус-фактор, открытый позднее также при содействии Ландштейнера.

Какие существуют группы крови по системе АВ0

Группы крови по системе АВО

Система АВ0 насчитывает 4 группы крови:

  • 0 (I) — отсутствуют антигены;
  • А (II) — антиген А;
  • В (III) — антиген В;
  • АВ (IV) — антигены А и В.

Антиген — это олигосахаридная цепь, связанная с мембранными белками и липидами эритроцитов. Отличаются антигены А и В между собой только различным концевым остатком олигосахарида.

Предшественником антигенов А и В является антиген Н, присутствующий на всех эритроцитах. По наследству ребёнок получает от отца и матери гены, кодирующие молекулярное строение будущих антигенов.

Ген А кодирует фермент, образующий из части антигенов Н антиген А, ген В способствует формированию антигена В с помощью антигена Н.

В 0 (I) группе крови присутствует ген Н и соответственно антиген Н, но связываться ему не с чем, так как гены А и В отсутствуют.

В редких случаях встречается феномен Бомбей, когда на эритроцитах нет антигена Н. В этом случае определяется группа как 0 (I), так как А и В не определяются. Но таким людям можно переливать кровь только от доноров с таким же фенотипом, что представляет сложность, подобная особенность встречается менее чем у 1% людей на планете.

Краткие характеристики четырех групп крови

Несовместимость групп приводит к «слипанию» эритроцитов

В каждой из групп помимо антигенов присутствуют антитела. При соединении разных групп крови антитела начинают взаимодействовать с антигенами, слипаясь, они разрушают эритроциты, что приводит к тяжёлым последствиям, в том числе летальному исходу. Каждая группа крови отличается наличием антител к иным группам, исключение — AB.

  • Группа 0 характеризуется антителами α и β, то есть обладатели этой группы не могут принять кровь ни A, ни В, ни АВ.
  • Группа А содержит агглютинины β, что означает несовместимость с группой В и АВ, но принять кровь от группы 0 возможно.
  • Группа В отличается антителами α, не совместима с А и АВ группами, подходят доноры с группой 0.
  • Группа АВ не может иметь антител к данным антигенам, так как агглютиногены и агглютинины не могут сосуществовать в одном организме, поэтому обладателям АВ подходят все группы.

Таким образом, 0 группа может быть универсальным донором, АВ группа — универсальным реципиентом. Но в настоящее время отказались от практики переливания разных групп, трансфузия осуществляется от доноров той же группы крови во избежание негативных последствий.

Каждая из групп может быть подразделена на подгруппы, например, антиген А включает антигены А1, А2, А3 и т.д., антиген В также содержит различные варианты подгрупп. Обычно подгруппы могут иметь значение при определении группы крови. Перед трансфузиями, во избежание возможного влияния вариации подгрупп антигенов, проводят пробу на индивидуальную совместимость.

Резус-фактор: отрицательный и положительный

Группы крови могут иметь отрицательный или положительный резус

Наряду с АВ0 важным значением обладает система — резус (Rh).

Отличие групп по резусам выявлено в 40-х годах XX века, когда врачи столкнулись с агглютинацией сыворотки пациентки с 3⁄4 образцов эритроцитов от доноров, хотя с некоторыми образцами было полное совпадение групп крови по АВ0.

Позже под руководством К. Ландштейнера доктор А. Винер обнаружил и описал такую же реакцию, полученную при помощи сыворотки крови макаки-резус, откуда и произошло название.

Rh представляет собой белок из группы антигенов, находящихся на поверхности эритроцитов. Среди различных антигенов, составляющих систему резуса, преимущественное значение имеет антиген D. Поэтому именно его наличие определяет положительный резус (Rh +), его отсутствие означает, что фактор крови отрицательный (Rh -).

При попадании резус-положительных кровяных телец в кровеносную систему с резус-отрицательными эритроцитами образуются аллоиммунные антитела. Организм воспринимает антиген D как чужеродный и старается от него избавиться.

Такое явление называется резус-конфликт.

Открытие Rh-системы позволило избежать негативных последствий при трансфузии, а также найти способ помочь беременным, у которых возникает резус-конфликт с плодом при наличии разных резус-факторов.

Rh передаётся по наследству по рецессивно-доминантному типу, где (Rh -) является рецессивным, а (Rh +) доминантным.

Определение группы крови

Определение групповой принадлежности методом агглютинации

Группу крови выявляют при помощи реакции агглютинации. Эритроциты соединяют с солевым раствором моноклональных антител, каждый из которых содержит агглютинины α, β, α и β. По реакции склеивания с определёнными антителами выявляется соответственная группа.

Группа А — форменные элементы соединились с агглютининами α.

Группа В — склеивание произошло в растворе с антителами β.

Группа АВ — процесс агглютинации не наблюдался ни с одним из антител.

Группа 0 — эритроциты слиплись с антителами каждого раствора.

Определение резус-фактора

Определение резус-принадлежности крови

Для выявления резус-принадлежности используют различные методы, наиболее распространёнными являются тесты, основанные на взаимодействии эритроцитов с антирезусной сывороткой в различных растворах.

Контрольный образец обычно представляет собой антирезусную сыворотку IV группы крови, то есть не содержащую антиген D, антигены А и В.

Если происходит характерная реакция агглютинации, резус определяется как положительный.

Может ли исследование показать ложный результат

Нарушение техники процедуры может привести к ошибке теста

Тест может отразить искажённый результат в случаях:

  1. Нарушение техники выполнения анализа:
    • Некорректная температура.
    • Неверное соотношение агглютининов и эритроцитов.
    • Недостаточное время наблюдения.
    • Ошибка в порядке расположения реактивов на пластине.
    • Некачественные реагенты.
  2. Трудноопределимые группы крови и резус-фактор.
    • Если антиген на эритроцитах обладает низкой способностью к агглютинации, например, антиген А представлен подгруппой А2.
    • При неспецифическом слипании форменных элементов, что может быть следствием аутоиммунных патологий.
    • Искажению результата способствуют кровяные химеры. Это состояние, когда эритроциты представлены в нескольких популяциях, а антигены относятся к различным группам. Может произойти из-за массивных трансфузий от доноров 0 (I) группы, после трансплантации, но обычно наблюдается у гетерозиготных близнецов.
    • Различные заболевания влияют на агглютинационную способность эритроцитов.
    • Иногда у новорожденных агглютиногены проявлены слабо, антитела отсутствуют.

Может ли меняться группа крови?

Группа крови — тема, раскрытая наукой не до конца

Раньше на этот вопрос существовал однозначный ответ «нет». Если регистрировалась другая группа либо фактор, результаты списывались только на ошибку лаборатории. На сегодняшний день, когда оборудование и реактивы усовершенствованы, вероятность ошибки становится меньше.

Учёные заинтересовались данным вопросом и начали разрабатывать теории, которые меняют представление о дифференциации крови по группам. Одна из них получила широкое распространение: человеческий род изначально представляет собой совершенно различные виды, которые жили раньше отдельно, не смешиваясь друг с другом, у каждого вида был свой набор генов.

Когда люди начали перемещаться географически и создавать пары, кровь последующих поколений уже являлась смешанной, с метисным геномом. Иммунная система начала вырабатывать антитела против неизвестных ей антигенов. Так образовались группы крови.

Так как современные люди являются, по сути, метисами, у них присутствуют всевозможные комбинации антигенов, которые под воздействием различных факторов (инфекция, беременность) могут активизироваться, что проявляется в результате как смена группы крови.

На деле же метисный мультиген метисного генома просто проявляет свои иные «стороны», то есть изначально содержит разные антигены, которые в один период жизни проявляются одними антигенами, в иной — другими.

Интерес к происхождению групп крови не угасает. Недавно были выявлены 2 новые группы крови учёными из Вермонта, считается, что существует ещё минимум 10 групп, которые пока не удаётся познать.

Источник: https://gidanaliz.ru/gruppa/rezus-faktora-gruppy-krovi.html

Методы как определить группы крови (стандартными сыворотками, цоликлонами)

определение группы крови и резус фактора стандартными сыворотками

В современной медицине группа крови характеризует набор расположенных на поверхности эритроцитов антигенов, которые определяют их специфичность.

Существует огромное количество таких антигенов (обычно применяется таблица групп крови с разнообразными антигенами), но повсеместно производится определение группы крови с использованием классификации по резус-фактору и системе АВ0.

Определение группы является обязательной процедурой при подготовке к любой операции.

Такой анализ также необходим при поступлении на службу в некоторые контингенты, среди которых военные, работники внутренних органов и силовых структур.

Данное мероприятие проводится из-за повышенного риска возникновения состояния, угрожающего жизни человека, в целях сокращения времени, требуемого для оказания помощи в виде переливания крови.

Состав крови различных групп крови

Суть системы АВ0 состоит в наличии структур антигенов на эритроцитах. В плазме нет соответствующих им типовых антител (гамма-глобулинов). Поэтому для исследования крови можно использовать реакцию «антиген + антитело».

Эритроциты склеиваются в момент встречи антигена и антитела. Подобная реакция носит название гемагглютинации. Реакция отображается в виде небольших хлопьев при проведении анализа. Исследование основано на получении изображения агглютинации с сыворотками.

Связываются антигены эритроцитов «А» с антителами «ά», а также «В» с «β» соответственно.

Выделяются следующие группы крови по составу:

  • I (0) – ά, β — поверхность эритроцитов совсем не содержит антигенов,
  • II (А) – β — на поверхности имеется антиген А и антитело β,
  • III (В) – ά — поверхность содержит В с антителом типа ά,
  • IV (АВ) – 00 — поверхность содержит оба антигена, однако не имеет антител.

Определение групп крови

Антигены есть у зародыша уже в состоянии эмбриона, а агглютинины (антитела) появляются на первом месяце жизни.

Стандартный метод

Существует множество техник, однако в лаборатории обычно используют определение с помощью стандартных сывороток.

Метод по стандартным сывороткам используется для определения типов антигенов АВ0. Состав стандартной изогемагглютинирующей сыворотки содержит набор антител к молекулам эритроцитов. В случае наличия антигена, который подвержен действию антител, формируется комплекс антиген-антитело, что запускает каскад реакций иммунитета.

Результатом данной реакции является агглютинация эритроцитов, на основании характера происходящей агглютинации можно определить принадлежность образца к какой-либо группе.

Для приготовления стандартной сыворотки используется донорская кровь и определенная система — посредством выделения плазмы, включающей антитела, и последующего ее разведения. Разведение выполняется с использованием изотонического раствора натрий хлорида.

Разведение производится так:

  • В пробирку, содержащую 1 миллилитр 0.9 %-го раствора пищевой соли, необходимо добавить 1 миллилитр плазмы. Раствор тщательно перемешать.
  • Затем пипеткой отбирают полученный раствор плазмы в объеме 1 миллилитр. Добавляют его в пробирку, которая содержит изотонический раствор. Так необходимо достигнуть разведения плазмы с соотношением 1 к 256. Применение других разведений несет риск возникновения диагностической ошибки.

Непосредственно исследование проводится таким образом:

  • На специальный планшет помещают по капле каждой сыворотки (общим объемом примерно 0.1 миллилитр) на участок, где имеется соответствующая пометка (применяются 2 образца, из них один – контрольный, второй предназначен для исследования).
  • Затем рядом с каждой каплей сыворотки размещают исследуемый образец в объеме 0.01 миллилитра, после чего его по отдельности смешивают с каждым диагностикумом.

Правила расшифровки результатов

Спустя пять минут можно производить оценку результатов исследования. В больших каплях сыворотки происходит просветление, в одних наблюдается реакция агглютинации (образуются мелкие хлопья), в других – нет.

: Определение группы крови и резус-фактора

Здесь возможны варианты:

  • Если реакции агглютинации нет в обеих пробах с сыворотками II и III (+ контрольные 1 и IV) — определение первой группы,
  • Если свертывание наблюдается во всех пробах, кроме II — определение второй,
  • При отсутствии реакции агглютинации только в пробе с III группы — определение III,
  • Если свертываемость наблюдается во всех пробах, в том числе в IV-контрольной — определение IV.

Когда сыворотки располагаются в правильном порядке и на тарелке стоят подписи, ориентироваться легко: группа соответствует местам с отсутствующей агглютинацией.

В некоторых случаях склеивание неясно различимо. Тогда анализ необходимо переделать, мелкую агглютинацию наблюдают под микроскопом.

Метод перекрестной реакции

Суть этой техники состоит в определении агглютиногенов при помощи стандартных сывороток или цоликлонов с параллельным определением агглютининов с помощью эталонных эритроцитов.

Техника анализа перекрестным методом практически не имеет отличий от исследования с помощью сывороток, но присутствуют некоторые дополнения.

На планшетку под сыворотками необходимо добавить по капле стандартных эритроцитов. Затем из пробирки с кровью пациента, прошедшую через центрифугу, пипеткой извлекают плазму, которую помещают к стандартным эритроцитам, находящиеся на дне – добавляют в стандартную сыворотку.

Так же, как и согласно технике стандартной методики, результаты исследования оценивают спустя несколько минут после начала реакции. В случае наличия реакции агглютинации можно говорить о наличии агглютининов АВ0, в случае реакции плазмы можно судить об агглютиногенах.

Результаты исследования крови с применением стандартных эритроцитов и сывороток:

Наличие агглютинации при реакции со стандартными изогемагглютинирующими сывороткамиНаличие агглютинации при реакции со стандартными эритроцитамиГруппы крови
0(I)A(II)B(III)AB(IV)0(I)A(II)B(III)
++0(I)
+++A(II)
+++B(III)
+++AB(IV)

+ агглютинация,

– агглютинация отсутствует,

реакцию не проводят.

Перекрестный метод получил распространение за счет того, что он предотвращает диагностические ошибки, возникающие при применении стандартных методик.

Определение группы крови цоликлонами

Цоликлоны — синтетические заменители сывороток, которые содержат в своем составе искусственные заменители агглютининов типов ά и β. Они называются эритротестами «Цоликлон анти-А» (имеют розовый цвет), а также «анти-В» (имеют синий цвет). Ожидаемая агглютинация наблюдается между агглютининами цоликлонов и эритроцитами крови.

Цоликлоны

Данная методика не требует двух серий, она является более надежной и точной. Проведение исследования и оценка его результатов происходят так же, как и в стандартном методе.

Вид цоликлоновГруппа крови
Результат агглютинацииАнти-ААнти-В
0(I)
+A(II)
+B(III)
++AB(IV)

IV группа (АВ) обязательно подтверждается агглютинацией с цоликлоном «анти-АВ», а также отсутствием склеивания эритроцитов в изотоническом растворе натрия хлорида.

Экспресс-методика с помощью набора «Эритротест-группокарт»

Хотя общепринятые способы определения принадлежности крови к конкретной группе распространены повсеместно, в современной медицине происходит внедрение экспресс-методов, самым распространенным из которых является “Эритротест”.

При определении группы с применением методики “Эритротест группокарт” необходим комплект инструментов, включающий следующие приборы:

  • Планшетка, имеющая с пять лунок, для произведения определения группы по ее резус-принадлежности и системе АВ0,
  • Скарификатор, предназначенный для получения образца, необходимого для исследования,
  • Стеклянные палочки для перемешивания образцов,
  • Чистая пипетка для набора растворов.

Все перечисленные инструменты необходимо для безошибочного проведения диагностики.

Набор для анализа крови “Эритротест-группокарт” позволяет проводить исследование резус-фактора и определение группы крови в любых условиях, она особенно эффективна при отсутствии возможности использования общепринятых методов.

В лунках на планшетке расположены цоликлоны к антигенам (это цоликлоны анти-А, -В, -АВ) и к основному антигену, который обуславливает наследование резус-фактора (это цоликлон анти-D). Пятая лунка содержит контрольный реагент, который позволяет предотвратить возможные ошибки и грамотно определить принадлежность к группе крови.

: Определения групп крови с помощью цоликлонов

Загрузка…

Источник: https://KardioBit.ru/krov/metody-opredeleniya-gruppy-krovi

Определение группы крови стандартными сыворотками – подробная информация

определение группы крови и резус фактора стандартными сыворотками

В наше время медицина достигла больших высот. Врачи способны проводить долгие операции и спасать людей даже из самых, казалось бы, безвыходных в плане выживания ситуаций.

Однако, в таких случаях приходится сталкиваться с проблемой необходимости переливания крови. Долгое время это было мало осуществимо в связи с тем, что пациенты умирали очень быстро.

Но данный вопрос был решен открытием понятия групп крови, а точнее обнаружения на эритроцитах антигенов и, в свою очередь, антител в плазме крови.

Определение группы крови стандартными сыворотками

Что есть группа крови

В начале двадцатого века Австралийский врач, по совместительству ученый К. Ландштейнер открыл наличие в крови антигенов и антител. Антигены находятся на поверхности эритроцитов. Их бывает 2 вида.

Для простоты биологи обозначили их как A и B. В свою очередь антитела содержатся в плазме крови и получили названия α и β. Если A соединить с α, а B с β, начнется процесс сворачивания крови.

Данная реакция носит название гемагглютинация.

Таким образом из имеющихся наборов антигенов и антител можно составить 4 типа крови, приведенных в таблице ниже:

Номер группыМировое обозначениеАнтигеныАнтитела
I0Отсутствуютα и β
IIAAβ
IIIBBα
IVABA и BОтсутствуют

Группы крови и характер

Важно! В зависимости от того, какой тип донорской крови предоставляется для переливания, кровь пациента либо сворачивается, либо нет. Первый случай грозит летальным исходом.

Сыворотки для проведения реакции

На текущий момент имеется достаточно большое количество способов определения группы крови. Но большая часть из них рассчитана на анализ в крупных лабораториях. Однако, даже если вы находитесь в маленькой деревушке или в месте, где никак не получится обратиться в подобные учреждения, возможность выявления номера группы крови все равно остается.

Определение группы крови осуществляется с применением четырех специальных стандартных сывороток, которые будут изготавливаться из крови человека. Они выпускаются либо во флакончиках, либо в ампулах по 2-5 мл и соответствуют разным группам крови:

  1. 0. Выпускается с белой этикеткой и имеет прозрачный цвет.
  2. A. Жидкость голубой окраски. На флакон наносятся две синие полосы.
  3. B. Жидкость бледно-розового оттенка. На флаконе присутствуют три полосы той же окраски.
  4. AB. Жидкость желтого окраса. На флакон нанесены 4 полосы того же цвета.

Сыворотки для проведения реакции на группу крови

Важно! На самом деле указанные реагенты при изготовлении не имеют цвета. Они окрашиваются специально, чтобы при использовании их было невозможно перепутать.

Также на этикетки наносятся:

  • титр;
  • дата производства;
  • срок годности;
  • данные об изготовителе;
  • серийный номер.

Как определяется группа крови

Чтобы определить группу крови, понадобится:

  • плоская тарелка с 8 углублениями;
  • стеклянные палочки или пипетки — 8 штук;
  • 2 набора сывороток разной серии для исключения возможности ошибок;
  • обычные или песочные часы.

Инструменты для определения крови стандартными сыворотками

На плоскую тарелку помещаются сыворотки в 2 ряда, после чего берутся стеклянные палочки. С их помощью в ряды вносится исследуемая кровь.

Этими палочками она размешивается, после чего тарелку начинают покачивать.

Если повезет, процесс можно отследить за 10-30 секунд, но лучше это делать до 5 минут, чтобы исключить возможность заторможенности реакции. Затем происходит изучение и расшифровка полученных результатов.

Внимание! В первую очередь следует обратить внимание на кружки, в которые была налита сыворотка II и III групп крови. Интерес представляет наличие мелких хлопьев, появляющихся в результате агглютинации — слипания эритроцитов.

  1. Если ни во II, ни III хлопьев нет, а также при дополнительной проверке ни в I, ни IV также ничего не свернулось, значит имеется первая группа крови.
  2. Если в результате свертывание отмечается везде, кроме сыворотки II группы, значит исследуемая кровь относится ко второй группе.
  3. Если свертывание наблюдается во всех образцах, кроме сыворотки III группы, значит исследуемая кровь относится к одноименной группе.
  4. Если сворачивание прошло во всех образцах, кроме сыворотки IV группы, значит анализу была подвержена одноименная группа крови.

Проведение определения группы крови

Важно!Строго говоря, группу крови можно определить, имея сыворотки только 2 и 3 группы крови. Однако, как можно сделать вывод из сути метода, имеется большое влияние человеческого фактора. По этой причине сыворотки I и IV группы крови используются в качестве дополнительной проверки.

После процедуры используемая посуда должна быть хорошо промыта теплой водой и высушена. Затем ее можно использовать для дальнейших исследований.

Неточности результатов и их причины

Иногда бывает так, что сгустки слипшихся эритроцитов видны не очень четко. Во время проверки зачастую может быть добавлен изотонический раствор хлорида натрия. Он позволяет исключить вероятность ложной агглютинации, заставляя рассыпаться обратно хлопья, получившиеся не в результате процесса свертывания.

Важно! Если результат анализа виден не особо четко, его необходимо переделать и воспользоваться микроскопом, чтобы рассмотреть мелкую агглютинацию.

В случае четко выявленного результата можно сразу точно назвать пациенту его группу крови. Иначе следует обратиться к другим методам проведения анализа.

Не стоит забывать и о возможности ошибок, которые обычно происходят по следующим причинам:

  • использование просроченной или слабой сыворотки;
  • использование слишком большого количества исследуемой крови по отношению к объему сыворотки;
  • реакция проводится намного дольше, чем положено нормативами;
  • температура окружающей среды не соответствует нормальной, в результате чего происходит холодовая агглютинация эритроцитов.

Наиболее частые причины ошибок при определении групп крови

Дополнительно стоит заметить, что в процессе высыхания по краям смеси сыворотки и исследуемой крови возможно образование зернистых участков, которые не могут служить показателями реакции.

Использование результата на практике

Как уже упоминалось, определение группы крови проводится для исключения летального исхода во время ее переливания. В идеале пациенту, принимающему кровь — реципиенту — необходимо переливать кровь той же группы, что и у него самого.

Однако так получается далеко не всегда. Хотя бы потому, что людей с первой группой крови подавляющее количество — 50%.

В то же время они являются универсальными донорами, поскольку у них отсутствуют агглютиногены, которые стимулируют процесс свертывания крови.

Внимание! Что касается пациентов с IV группой крови, то их можно назвать универсальными реципиентами, поскольку их организм способен принять кровь любой группы. В то же время их кровь не может быть перелита представителям другой группы.

Для наглядности совместимости доноров и реципиентов приведем таблицу:

Номер группыДля каких групп становится доноромДля каких групп становится реципиентом
II, II, III, IVI
IIII, IVI, II
IIIIII, IVI, III
IVIVI, II, III, IV

Совместимость групп крови

В современном мире знание группы крови жизненно необходимо. От этого, с точки зрения врачей, будет зависеть коэффициент выживаемости из пациентов. С точки зрения обычных людей это шанс в экстренной ситуации сохранить свою жизнь.

В связи с этим не лишним будет знать свою группу крови и, по возможности, проставлять ее в паспорт либо другие документы, поскольку риск здоровью и жизни может возникнуть в любой момент.

Желчь медицинская применение при пяточной шпоре инструкция изучайте по ссылке.

— Определение группы крови и резус-фактора

Источник: https://med-explorer.ru/serdechno-sosudistaya-sistema/simptomatika-i-diagnostika-serdechno-sosudistaya-sistema/opredelenie-gruppy-krovi-standartnymi-syvorotkami.html

Определение группы крови стандартными сыворотками – суть метода, этапы проведения

определение группы крови и резус фактора стандартными сыворотками

Во многих случаях скорую медицинскую помощь пострадавшему человеку возможно оказать только при знании принадлежности его крови по классификации АВ0. Ведь бывают ситуации, когда кровотечение невозможно остановить оперативно, и переливание – это необходимая манипуляция для реанимации пациента. В экстренных случаях невозможно узнать группу и резус.

Так же важно проводить подобные исследования при планировании и во время вынашивания ребенка для определения трансфузионной совместимости и для выявления риска проявления гемолитической болезни у новорожденного, причиной которой становится несовместимость крови матери и плода по системе AB0. Возможные различия могут привести к иммунным конфликтам в организме матери. Поэтому стоит как можно раньше узнать о наличии или отсутствии теоретически возможного заболевания.

Для этого существуют моментальные тесты, позволяющие определить тип крови.

Суть метода на основе сыворотки

Сывороточный метод хорош в тех случаях, когда из-за дополнительных сложностей с определением группы крови (например, иммуно-дефицитный, возрастной фактор) требуется довольно широкий спектр тестов. Сыворотка же способна свести множество измерений к одному.

Под группой в гематологии подразумевается набор антигенов, которые, располагаясь на эритроцитах, определяют их особенности.

Антигены представляют собой огромный ряд веществ с разными свойствами и качественными характеристиками, но классифицируют по двум системам:

  • Система AB0. Представляет собой два эритроцитных антигена, объединённых в группы – агглютиногены A и B, плюс два соответствующим им антитела – a (анти-А) и b (анти-B). Их совокупность или же сочетание друг с другом и образует разнообразие известных сегодня групп крови (всего их 4). Отдельно выделяется ряд разновидностей сильных или слабых вариантов одних и тех же антигенов. Например, антиген A1, имеющий концентрацию более 80% или A2, составляющий 20% и так далее. Знание такой теоретической специфики предназначено для предотвращения ошибки в результатах исследования, которая может привести к летальному исходу, так как схема реанимационного лечения будет полностью нарушена, и возможность найти нового донора с соответствующей группой крови не всегда есть.

Строго необходимо переливать кровь, эритроциты и плазму того типа, который отмечен у реципиента, чтобы при переливании не произошла реакция отторжения. В ситуациях особенной экстренности возможно переливание эритроцитов группы 0, у которых отсутствуют групповые агллютиногены.

  • Система резус-фактора. Резус-фактор – это еще один антиген, который обозначается латинской буквой D. Он либо присутствует на эритроцитах (любой группы по АВ0), либо нет. В последнем случае человек считается резус-отрицательным. Есть и другие резус-антигены, но они гораздо менее иммуногенны, не вызывают реакции отторжения и поэтому не учитываются.

Стандартные сыворотки для определения группы крови – это специальные растворы, полученные путем извлечения из донорской крови плазмы с входящими в неё антителами и разведенные добавлением в этот состав изотонического раствора хлорида натрия.

Методика определения показателей

Алгоритм, который обуславливает определение группы крови и резус-фактора стандартными сыворотками, сводится к ряду манипуляций.

Изготовление сыворотки

Самый логичный и общепринятый шаг в процедуре изготовления сыворотки – это отмывание заранее полученной от донора крови для предотвращения попадания в организм реципиента инородных веществ, которые в дальнейшем могут вызвать реакцию, которая послужит причиной для неверного трактования результатов. Далее, путем центрифугирования, плазма крови в очищенном состоянии готова к использованию в изготовлении сыворотки.

Далее идёт ее разведение. В пробирку, которая должна содержать 1 мл 90% пищевой соли, постепенно добавляется 1 мл плазмы крови. После чего полученный раствор тщательно перемешивается.

Из полученного ранее раствора пипеткой отделяют 1 мл плазмы, после чего он добавляется во вторую емкость, наполненную изотоническим раствором. Необходимо соблюдать строгое соотношение плазмы, равное 1:256. В противном же случае состав крови при последующих исследованиях может быть определён неверно.

Логично отметить, что сыворотки, предназначенные для определения группы крови, разные по составу. Всего для единичного исследования используют три стандартные сыворотки двух серий для каждой группы, различные по цвету:

  • I(0) – не имеет окраски,
  • II(А) – голубая и III(B) – розоватая.

На одно исследование приходится две сыворотки одного типа: одна считается контрольной, другая же, собственно, служит для самого исследования.

Проведение исследования

Определение группы крови сыворотками проводится строго при температуре 15-25 градусов по Цельсию. Помещение, в котором проводится данное клиническое исследование, должно быть хорошо освещено и быть предназначено именно для таких тестов. Для его проведения потребуется приготовить следующие приспособления и инструменты для измерений:

  • продезинфицированную заранее посуду белого цвета,
  • гигроскопическую вату,
  • карандаш, которым нужно в дальнейшем поделить тарелку на сектора,
  • набор из специальных стеклышек и палочек,
  • три пипетки,
  • непосредственно стандартные сыворотки, представленные 0(I), А(II) и В(III) гр. крови,
  • изотонический раствор хлорида натрия, йод и муравьиный спирт для обработки.

Исследования для каждой группы проводится отдельной пипеткой для исключения возможных диагностических ошибок.

https://www.youtube.com/watch?v=cdUeTZAbHYo

Как описано ранее, определение группы крови и резус-фактора стандартными сыворотками основывается на реакциях, происходящих с эритроцитами в период проведения исследования. Поэтому очень важно следить за состоянием оборудования и инструментов для теста, категорически избегая попадания на них влаги, которая разрушает структуру кровяных клеток.

Процесс исследования:

  • На тарелку, предварительно разделенную на три участка (сектора) карандашом, размещают при помощи пипетки три образца сыворотки разных видов. И помечают рядом с каждой каплей наименование раствора, соответствующего типу крови.
  • После того как капля сыворотки размещена на помеченном для неё секторе, пипетку необходимо тут же вернуть в ту же ёмкость, в которой она была ранее.
  • Далее идёт обработка пальца перед взятием крови, которая заключается в простом дезинфицировании участка кожи медицинским спиртом. Затем выполняют забор крови посредством укола в мякоть пальца.
  • Полученная алая жидкость собирается предметным стеклом или палочкой в количестве трёх капель, которые не должны превышать по размеру величину головки простой швейной булавки. Отобранные капли аккуратно перемещаются на тарелку с остатками сывороток. После данной манипуляции начинают подсчет времени при помощи часов.
  • Кровь аккуратно перемешивается с сывороточным раствором в строгих пределах каждого сектора при помощи специальных для каждого отдела стеклянных палочек. Палочки после единичного действия должны сменяться на новые. Проводить повторяющуюся манипуляцию надо до тех пор, пока образующиеся консистенции не приобретут однородный розовый оттенок.
  • По истечению пяти минут (время контролируется по часам), когда растворы находятся в состоянии протекании реакции, к ним добавляется изотонический хлорид натрия в количестве одной капли на каждый из секторов. Затем тарелку слегка раскачивают, чтобы образцы крови перемешались с добавленным в него составом, но не слишком сильно, чтобы образцы не смешались между собой.

Этот шаг завершающий – далее же можно наблюдать результаты анализа с использованием сыворотки для определения группы крови.

Подробнее о том, как происходит определение типа крови, рассказывается в представленном ниже ролике:

Результаты исследования

При положительном результате в течение нескольких первых минут, ещё до добавления изотонического раствора, происходит склеивание эритроцитов, которое проявляется в возникновении красных сгустков в реагирующем растворе.

В дальнейшем эти зернышки могут, сливаясь друг с другом, образовывать красные «островки». Если же говорить научным языком, это гемагглютинация – процесс склеивания между собой с дальнейшим выпадением в осадок эритроцитов крови.

Если же после проведённых манипуляций розовый цвет раствора остался неизменным, то реакция, что логично, является отрицательной.

Существует ряд закономерностей, которые зависят от комбинаций положительных и отрицательных реакций в сыворотках:

  • В случае если положительной реакции нет ни в одном из исследуемых секторов, то это означает, что реципиент имеет кровь группы 0(I).
  • Если неизменной осталось состояние сыворотки А(I), а две остальные дали положительную реакцию, это значит, что кровь исследуемого имеет А(II) группу.
  • В случае отрицательной реакции только на В(III) из всех трёх говорят, что реципиент имеет ту группу крови, на которую не «пошла», то есть В(III).
  • Если же красные зернышки образовались в каждой из трёх жидкостей, то такая кровь относится к AB(IV) группе.

Для удобства запоминания используется либо схема, либо таблица. Возникновение иных комбинаций относят к ошибочным, получившимся из-за погрешностей при проведении исследования.

Существует ряд таких погрешностей:

  • Неверная концентрация крови, используемой для измерения. Обычно к ложным результатам приводит превышение заданной нормы для добавления к сыворотке.
  • Несвежесть взятых образцов сыворотки или их неправильное хранение приводит к малоактивным реакциям с эритроцитами.
  • Низкие температуры могут привести к панагглютинации, которая, как правило, тоже проходит очень слабо.
  • Неточность временных рамок может привести к подсыханию поверхности сыворотки. То есть результат исследования становится почти не заметен.

Метод проведения исследования на предмет группы крови с использованием стандартных сывороток – самый распространённый среди мгновенных исследований в условиях экстренной необходимости. Это делает его наиболее значимым и уникальным в условиях современной медицины.

Несколько стандартных способов определения группы и резуса крови, используемых в частных и муниципальных лабораториях:

Загрузка…

Источник: https://dlja-pohudenija.ru/serdcze/analiz-krovi/kak-opredelyayut-gruppu-krovi-standartnymi-syvorotkami-metody-i-osobennosti-provedeniya

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.